Mikrobiológiai monitoring a tisztatérben

Ábra.1: Légi részecskeszámláló HHP6+

Ábra. 2: Petri-Light tollal

A gyógyszergyártásban alkalmazott követelmények egyre szigorúbb szabályozásnak vannak alávetve, egyre több gyártási folyamatnak kell különleges, higiénikus körülmények között zajlania. A tartósítószerek elhagyása szintén teljesen tiszta gyártási körülményeket követel meg. A levegő mikroorganizmus terhelésének ellenőrzésére légfertőzöttség-gyűjtőket alkalmaznak. A következő cikk betekintést nyújt a légfertőzöttség-gyűjtők gyakorlati alkalmazásának hátterébe és részleteibe.

A levegő mikroorganizmus-koncentrációjának ellenőrzésére speciális készülékeket fejlesztettek ki, amelyek különleges kialakításuk révén lehetővé teszik részek gyűjtését akár 1 μm-es méretig is. A légfertőzöttség-gyűjtés módszerként az Anderson-elvet alkalmazzák. Ennek során a levegőt meghatározott sebességgel beszívják, és a részecskéket közvetlenül egy agar felületre lövik, amely egyben tápanyagként is szolgál. A mikroorganizmusok közvetlen ütközése az agarral töltött Petri-csészén, az ún. impaktálási elvet nevezzük. Ennek előnye, hogy nem szükséges szűrőket manipulálni. A mintavétel egyszerűsödik, és gyakorlatilag kizárható a másodlagos szennyeződés.

Az alkalmazásnak megfelelő légfertőzöttség-gyűjtők kiválasztási kritériumai

A légfertőzöttség-gyűjtőknek kézbe vehetőnek és könnyen fertőtleníthetőnek kell lenniük. A gyakorlatban periodikus kalibrálás szükséges. Vásárláskor feltétlenül ellenőrizni kell, hogy ez helyszínen is lehetséges-e, mivel a gyógyszeripari területen a készülékek nem mindig hagyhatják el a létesítményt. A tisztaterek, izolátorok, RABS, mikrobiológiai laboratóriumok, biotechnológiai és vakcina-előállító berendezések, műtők, kórházak és klinikák ellenőrzésére és validálására a DUO SAS Super 360 is alkalmazható, ha időmegtakarítás fontos szempont. Ez a légfertőzöttség-gyűjtő egyidejűleg két gyűjtőedénnyel működik, és 180 L/perc sebességgel dolgozik.

A SAS Super Pinocchio II mikrobiológiai ellenőrzésre készült levegő és más nyomásgázok esetében a gyógyszer- és élelmiszeriparban, valamint más kritikus területeken. A nyomásgázt közvetlenül a készülékhez csatlakoztatják. A mintavételi időtartamot úgy állítják be, hogy elérje a szükséges össztérfogatot (pl. 1000 liter).

A levegő mintavétele és elemzése a gyakorlatban

A mintavétel:

- Helyezze a készüléket stabil felületre
- Nyissa ki a nyílásfedőt (porvédő fedéllel együtt)
- Helyezzen egy zárt, agarral töltött standard Petri-csészét a Petri-csésze tartóhelyére
- Vegye le a Petri-csésze fedelét
- Zárja vissza a nyílásfedőt
- A gyűjtőfejet a levegőáramlásnak megfelelően helyezze el (a gyűjtőfej bármilyen szögben beállítható, a horizontális és vertikális légáramlás irányába)
- Vegye le a porvédő fedelét, és kezdje el a mintavételt

A tenyésztés:

A Petri-csésze most készen áll a tenyésztésre. A követelményektől és a kérdéstől függően különböző tápanyagokat lehet alkalmazni. Vannak különböző tápanyagok élesztőkre, penészgombákra és baktériumokra, amelyek összetételben és pH-értékben különböznek. Különösen ajánlott a DG 18 agar, amely egy speciális tápanyag a levegőben lévő mikroorganizmusok számára. A lemez típusának és a tápanyagnak a kiválasztása meghatározza a megfelelést a legfontosabb gyógyszertári szabványokkal, ISO-irányelvekkel és cGMP-vel. Általában a környezeti baktériumokat 24–68 órán keresztül inkubálják 30 °C-on, míg a élesztőket és penészgombákat legalább 7 napon át 25 °C-on.

A tápanyagok kezelésénél be kell tartani a gyártó utasításait. Ahogyan a tapadásos lemezek esetében, a Petri-csészéket speciális mikrobiológiai kontrollokra szánt tápanyagokkal szállítják levegő és felületek ellenőrzésére. A steril háromrétegű csomagolás lehetővé teszi, hogy a lemezeket alacsony szennyezettségű környezetben vagy steril területeken tovább szállítsák (az egyik külső csomagolási réteget eltávolítják, mielőtt belépnek egy tisztatérbe).

A tapadásos lemezek esetében az az előny is megvan, hogy ugyanaz a típusú lemez használható levegő- és felületi ellenőrzésre egyaránt. Ezzel szemben a 90 mm-es Petri-csészék nagyobb felületet biztosítanak a kolóniák számolásához, és különösen hasznosak, ha a várt kolóniák száma meghaladja a 100 kolóniát az „lemezen”.

A tapadásos lemezek és Petri-csészék a VWR-től származnak, amelyek neutrálószerekkel (Tween, Lecithin, Histidin, Thiosulfát) és antibiotikum-neutrálószerekkel (Penicillinase) is elérhetők, hogy a mikroorganizmusok száma ne legyen alulbecsülve.

A VWR napi szintű ellenőrzéshez ISO 14644/1 szerint részecskeszűrőket is kínál. Ezek 0,5 μm és 5 μm részecskeméretek vizsgálatára alkalmasak. A különböző modell típusok fő különbségei a csatornák számában és a mérhető részecskeméretekben rejlenek. Egy töltőállomás tartja a készüléket függőleges helyzetben használat, tárolás vagy akkumulátor töltése közben. A töltőállomás adat- és áramellátási csatlakozókkal rendelkezik. A készülék elülső oldalán található LCD-kijelző és a 7 gombos billentyűzet felhasználói felületként szolgál. A készülék a gyűjtött adatokat flash memóriában tárolja. Az adatok megmaradnak a kikapcsolás után is. Az adatok megjeleníthetők a kijelzőn,
átvihetők USB-kábellel számítógépre vagy laptopra, USB-meghajtóra menthetők, vagy Ethernet-kapcsolaton keresztül továbbíthatók. Szoftver külön telepítése nem szükséges.