Monitoreo microbiológico en la sala limpia

Abb.1: Contador de partículas en el aire HHP6+

Fig. 2: Petri-Light con bolígrafo

Los requisitos en la producción farmacéutica están sujetos a regulaciones cada vez más estrictas, cada vez más procesos de fabricación deben realizarse bajo condiciones especiales, higiénicamente impecables. La abstención de conservantes también requiere condiciones de producción absolutamente puras. Para verificar la carga de microorganismos en el aire, se utilizan colectores de aire con microorganismos. La siguiente contribución ofrece una visión general de los antecedentes y detalles de aplicación de los colectores de microorganismos en la práctica.

Para verificar la concentración de microorganismos en el aire, se han desarrollado dispositivos especiales que, por su construcción particular, permiten recoger partículas de hasta 1 μm. Como método para la recolección de microorganismos en el aire, se ha establecido el principio Anderson. En este, el aire se aspira a una velocidad determinada y las partículas son lanzadas directamente sobre una superficie de agar, que también sirve como medio de nutrición. El impacto directo de los gérmenes sobre la placa de Petri llena de agar se denomina principio de impacto. Esto tiene la ventaja de que no son necesarias manipulaciones con filtros. La toma de muestras se simplifica y se excluye prácticamente la contaminación secundaria.

Criterios para la selección de colectores de microorganismos en aire adecuados para la aplicación

Los colectores de microorganismos en aire deben ser manejables y fáciles de desinfectar. La práctica exige una calibración periódica. Al comprar un dispositivo, se debe verificar si esto también es posible en el lugar, ya que en el sector farmacéutico los dispositivos no siempre pueden salir del recinto. Para el control y validación de salas limpias, aisladores, RABS, laboratorios microbiológicos, instalaciones de biotecnología y producción de vacunas, quirófanos, hospitales y clínicas, también se puede utilizar el DUO SAS Super 360, si la economía de tiempo es un criterio importante. Este colector de microorganismos en aire funciona simultáneamente con 2 vasos de recolección y a una velocidad de 180 L/minuto.

SAS Super Pinocchio II está diseñado para la verificación microbiológica del aire y otros gases comprimidos en la industria farmacéutica y alimentaria, así como en otras áreas críticas. El gas comprimido se conecta directamente al dispositivo. El período de toma de muestras se ajusta en el tiempo para alcanzar el volumen total requerido (por ejemplo, 1000 litros).

La toma de muestras y análisis del aire en la práctica

La toma de muestras:

- Colocar el dispositivo sobre una base estable
- Abrir la tapa con orificio (con la tapa antipolvo puesta)
- Colocar la placa de Petri cerrada, llena de agar, en las ranuras de soporte de placas de Petri
- Retirar la tapa de la placa de Petri
- Cerrar la tapa con orificio
- Posicionar la cabeza de recolección según la dirección del flujo de aire (la cabeza de recolección puede orientarse en cualquier ángulo desde flujo de aire horizontal hasta vertical)
- Retirar la tapa antipolvo y comenzar la toma de muestras

El cultivo:

La placa de Petri está ahora lista para el cultivo. Dependiendo de la exigencia y la pregunta, se pueden usar diferentes medios de nutrición. Existen medios específicos para levaduras, mohos y bacterias, que difieren en composición y pH. Sin embargo, se recomienda especialmente el agar DG 18, un medio de nutrición especializado para microorganismos del aire. La elección del tipo de placa y medio es determinante para la conformidad con las principales farmacopeas, normas ISO y cGMP. Por lo general, las bacterias del medio ambiente se incuban durante 24 a 68 horas a 30 °C, y las levaduras y mohos durante al menos 7 días a 25 °C.

Al manipular los medios, se deben seguir las instrucciones del fabricante. Al igual que las placas de contacto, las placas de Petri con medios especiales se entregan para el control microbiológico del aire y superficies. Gracias al embalaje estéril triple, las placas pueden transportarse en entornos con baja contaminación o en áreas estériles (una de las tres capas externas de embalaje se retira antes de ingresar a una sala limpia).

Las placas de contacto también tienen la ventaja de que el mismo tipo de placa puede usarse tanto para controles de aire como de superficies. Por otro lado, las placas de Petri de 90 mm ofrecen una superficie mayor para el conteo de colonias y son especialmente útiles cuando el número esperado en la "placa" supera las 100 unidades formadoras de colonias.

Las placas de contacto y las placas de Petri de VWR están disponibles con neutralizadores (Tween, lecithina, histidina, tiosulfato) y neutralizadores con antibióticos (penicillinasa), para evitar que la cuenta de microorganismos sea subestimada.

VWR también ofrece colectores de partículas para la verificación diaria según ISO 14644/1. Estos se utilizan para la detección de partículas de 0,5 μm y 5 μm. Los diferentes modelos varían principalmente en el número de canales y en el tamaño de partículas que pueden contar. Una estación de carga mantiene el dispositivo en posición vertical durante su uso, almacenamiento o carga de la batería. La estación de carga también tiene conexiones de datos y energía. La pantalla LCD y el teclado de 7 botones en la parte frontal del dispositivo sirven como interfaz de usuario. El dispositivo almacena los datos recopilados en memoria flash. Los datos permanecen almacenados incluso cuando el dispositivo se apaga. Los datos pueden mostrarse en la pantalla, transferirse a un PC o portátil mediante un cable USB, guardarse en una memoria USB o transmitirse a través de una conexión Ethernet. No se requiere software especial.