Microbiologische Überwachung im Reinraum

Afbeelding 1: Luchtdeeltjescounter HHP6+

Fig. 2: Petri-Light met pen

De eisen in de farmaceutische productie ondergaan steeds strengere voorschriften, steeds meer productieprocessen moeten onder bijzondere, hygiënisch onberispelijke omstandigheden plaatsvinden. Ook het ontbreken van conserveermiddelen vereist absoluut schone productieomstandigheden. Om de belasting van de lucht met micro-organismen te controleren, worden luchtmicrobenverzamelaars gebruikt. De volgende bijdrage geeft inzicht in de achtergronden en toepassingsdetails van luchtmicrobenverzamelaars in de praktijk.

Voor het controleren van de concentratie micro-organismen in de lucht zijn speciale apparaten ontwikkeld die door hun bijzondere constructie in staat zijn om delen tot 1 μm te verzamelen. Als methode voor de luchtmicrobenverzameling heeft het Anderson-principe zich bewezen. Daarbij wordt de lucht met een bepaalde snelheid aangezogen en de deeltjes rechtstreeks op een agaroppervlak geslingerd, dat tevens dient als voedingsmedium. Het directe botsen van de microben op de met agar gevulde petrischaal wordt het impactieprincipe genoemd. Dit heeft als voordeel dat geen filtermanipulaties nodig zijn. De monstersname wordt vereenvoudigd en een secundaire besmetting wordt praktisch uitgesloten.

Criteria voor de selectie van toepassingsgerichte luchtmicrobenverzamelaars

Luchtmicrobenverzamelaars moeten handzaam en gemakkelijk te desinfecteren zijn. De praktijk vereist periodieke kalibratie. Bij de aanschaf van een apparaat moet daarom zeker worden gecontroleerd of dit ook ter plaatse mogelijk is, aangezien apparaten in de farmaceutische sector niet altijd het terrein mogen verlaten. Voor controle en validatie van cleanrooms, isolatoren, RABS, microbiologische laboratoria, biotechnologie- en vaccinfabrieken, operatiekamers, ziekenhuizen en klinieken kan ook de DUO SAS Super 360 worden ingezet, vooral als tijdsbesparing een belangrijke factor is. Deze luchtmicrobenverzamelaar werkt gelijktijdig met 2 verzamelkokers en met een snelheid van 180 L/minuut.

SAS Super Pinocchio II is ontworpen voor microbiologische controle van lucht en andere drukgassen in de farmaceutische en voedingsmiddelenindustrie, evenals in andere kritieke gebieden. Het drukgas wordt rechtstreeks op het apparaat aangesloten. De monsternameperiode wordt zo ingesteld dat het vereiste totale volume wordt bereikt (bijvoorbeeld 1000 liter).

De luchtmonstering en -analyse in de praktijk

De monstersname:

- Plaats het apparaat op een stabiele ondergrond
- Open de deksel met opening (met aangebracht stofdeksel)
- Plaats de gesloten, met agar gevulde standaard petrischaal op de houderplaatsen voor petrischalen
- Verwijder de deksel van de petrischaal
- Sluit de opening af
- Positioneer de verzamelkop volgens de luchtstroomrichting (de verzamelkop kan in elke hoek van horizontale tot verticale luchtstroom worden uitgelijnd)
- Verwijder het stofdeksel en start de monstersname

De incubatie:

De petrischaal is nu klaar voor de incubatie. Afhankelijk van de eisen en de onderzoeksvraag kunnen verschillende voedingsmedia worden gebruikt. Er zijn verschillende media voor gisten, schimmels en bacteriën, die verschillen in samenstelling en pH. Vooral wordt aanbevolen het DG 18-agar, een speciaal voedingsmedium voor luchtmicroben. De keuze van het plaattype en het medium is bepalend voor de conformiteit met de belangrijkste farmacopeeën, ISO-normen en cGMP. Gewoonlijk worden milieusbacteriën geïncuveerd gedurende 24 tot 68 uur bij 30 °C en gisten en schimmels gedurende minimaal 7 dagen bij 25 °C.

Bij het omgaan met de media moeten de instructies van de media fabrikant worden nageleefd. Net als afstrijkplaten worden petrischalen geleverd met speciale media voor microbiologische controle van lucht en oppervlakken. Door de steriele driedubbele verpakking kunnen de platen worden getransporteerd in omgevingen met lage contaminatie of in steriele zones (een van de drie buitenlagen wordt verwijderd voordat een cleanroom wordt betreden).

Bij afstrijkplaten is bovendien het voordeel dat dezelfde soort plaat zowel voor lucht- als voor oppervlakkencontroles kan worden gebruikt. Omgekeerd bieden 90-mm petrischalen een groter oppervlak voor het tellen van kolonies en zijn vooral nuttig wanneer het verwachte aantal op de 'plaat' 100 kolonievormende eenheden overschrijdt.

Afstrijkplaten en petrischalen van VWR zijn verkrijgbaar met neutralisatoren (Tween, lecithine, histidine, thiosulfaat) en met antibiotica-neutralisatoren (penicillinase), zodat het aantal kiemen niet te laag wordt ingeschat.

VWR biedt voor de dagelijkse controle volgens ISO 14644/1 ook partikelsamplers aan. Deze worden gebruikt bij de controle van deeltjesgrootten van 0,5 μm en 5 μm. De belangrijkste verschillen tussen de verschillende modeltypen liggen in het aantal kanalen en de te tellen deeltjesgroottes. Een oplaadstation houdt het apparaat in een verticale positie tijdens gebruik, opslag of het opladen van de accu. Het oplaadstation beschikt ook over data- en stroomaansluitingen. Het LCD-scherm en het 7-toetsenbed aan de voorkant van het apparaat dienen als gebruikersinterface. Het apparaat bewaart verzamelde data in het flashgeheugen. De gegevens blijven bewaard wanneer het apparaat wordt uitgeschakeld. Data kunnen op het display worden weergegeven,
met een USB-kabel worden overgezet naar een PC of laptop, worden opgeslagen op een USB-stick of via een Ethernet-verbinding worden verzonden. Er is geen speciale software nodig.