Pratiques éprouvées pour tester l'efficacité des désinfectants

Résumé

Les désinfectants et sporicides sont indispensables pour contrôler les contaminations microbiologiques dans l'industrie pharmaceutique, biotechnologique et des dispositifs médicaux. Il est attendu des sites de production conformes aux BPF qu'ils démontrent, à l'aide de méthodes de préparation spécifiques au site décrites dans les procédures standard, que les biocides utilisés dans des environnements contrôlés sont efficaces contre des isolats environnementaux sur des surfaces représentatives dans leurs installations. Cet article présente les problèmes courants signalés par les inspecteurs réglementaires et rencontrés lors de la qualification des désinfectants et sporicides, ainsi que les difficultés possibles lors de la réalisation de tests d'efficacité in vitro.

Qualification du désinfectant1

1. Test in vitro

Test en laboratoire montrant l'efficacité des produits chimiques sélectionnés contre des isolats environnementaux sur des surfaces représentatives spécifiques à l'installation.

2. Test in situ

Comparaison statistique de la fréquence d'isolement et du nombre de micro-organismes isolés avant et après l'utilisation d'un nouveau désinfectant (données recueillies par surveillance de l'environnement).

Pourquoi qualifier les désinfectants ?

- Attendu par les autorités dans le cadre d'un programme fiable de nettoyage et de désinfection – La pertinence, l'efficacité et les limites des désinfectants et procédures doivent être évaluées ("The suitability, efficacy, and limitations of disinfecting agents and procedures should be assessed").2

- Les exigences d'enregistrement de l'EPA pour les produits biocides ne précisent pas leur utilisation dans l'industrie pharmaceutique, biotechnologique et des dispositifs médicaux.

FDA 483 / Catégories de lettres d'avertissement

-Absence de données prouvant la pertinence des biocides utilisés

- Les isolats environnementaux ne sont pas inclus dans le test

- Les coupons de test ne sont pas représentatifs des sols, murs et surfaces de travail dans la zone de traitement aseptique, y compris les surfaces usées ou endommagées

- Aucune donnée sur la date de péremption des solutions d'usage (par ex. durée de conservation)

- Aucune donnée sur la définition du temps de contact (le temps de contact avec des surfaces visiblement mouillées doit être atteignable dans le délai indiqué par les procédures standard de l'installation)

Requalification

- Vérification annuelle pour évaluer le risque et les changements intervenus

- Une nouvelle qualification peut être nécessaire dans les cas suivants :
• Introduction de nouveaux désinfectants
• Changement du nombre de micro-organismes dans l’environnement et/ou isolement d’organismes intrinsèquement résistants (par ex. B. cereus)
• Mise en place de nouvelles surfaces
• Changements dans les paramètres critiques d’utilisation des désinfectants

Test in vitro

Les causes les plus fréquentes d’échec des tests :

Général :

- Tests de biocides contre des micro-organismes incorrects
- Utilisation de méthodes inappropriées
- Planification insuffisante
- Temps de contact insuffisant

Neutralisation :

- Neutralisation inadéquate
- Toxicitée du neutralisant

Inoculum :

- Faible viabilité des suspensions d’inoculum
- Préparations incorrectes de suspensions de spores fongiques et de spores bactériennes

Surfaces :

- Surfaces poreuses
- Coupons de test non accessibles à la stérilisation à la vapeur
- Inoculation ou couverture du produit inégales en raison de cavités ou de tension superficielle

Relevé :

- Effet de réduction après séchage (par ex. P. aeruginosa)
- Fixation d’objectifs de réduction logarithmique artificiellement élevés
- Les plaques finales ne sont pas comptables
- Méthode de récupération non validée

Considérations importantes pour éviter les échecs de tests

Généralités

- Lire les étiquettes des produits pour comprendre leurs revendications et restrictions (par ex. revendications d’efficacité et temps de contact).

- Utiliser le type de produit chimique approprié pour les organismes cibles (par ex. ne pas utiliser 70 % IPA ou quats contre les spores bactériennes).

- Les méthodes AOAC ne conviennent pas pour ces tests (certaines procédures comme la préparation de l’inoculum et des suspensions de spores peuvent toutefois être utiles).

- Les méthodes ASTM E2197 et EN-13697 offrent des perspectives précieuses pour les tests de surface quantitatifs.

- Ne pas combiner la décontamination physique et l’élimination chimique dans une même étude.

- Inclure dans l’étude les dates de péremption définies dans les procédures standard internes.

- La cohérence est essentielle pour le résultat.

- La planification préalable est extrêmement importante et certains tests expérimentaux peuvent être nécessaires.

Neutralisation

- La méthode de neutralisation doit être validée.

- L’efficacité et la toxicité du neutralisant doivent être testées.

- Avant de commencer l’étude, certains essais et expérimentations peuvent être nécessaires.

- Il n’existe pas de neutralisant universel pour tous les désinfectants.

Inoculum

- Préparer des suspensions bactériennes à partir de cultures de 18-24 heures et inoculer immédiatement les surfaces ; ne pas utiliser sur plusieurs jours.

- Utiliser une suspension de spores fongiques pour tester et vérifier la charge en spores ; les hyphes/mycéliums peuvent empêcher le biocide de contacter et de pénétrer dans les spores.

- Préparer des suspensions de spores bactériennes selon une méthode recommandée comme AOAC ; ≥90 % de spores.

Surfaces

- Les petits coupons de test (1–2 cm) sont plus faciles à traiter et neutraliser.

- Éliminer les résidus avec de l’IPA à 70 %.

- Utiliser des méthodes de stérilisation alternatives (par ex. VHP®, chaleur sèche) si les surfaces ne peuvent pas être autoclaves.

Relevé

- La méthode de récupération doit être validée.

- Une sonication peut aider à la récupération.

- Sécher les coupons contaminés aussi brièvement que possible et tester immédiatement.

- Évaluer la méthode de récupération avant de lancer les tests formels dans des études expérimentales.

Remarque finale

La qualification des désinfectants est une étape critique dans la validation du processus de désinfection utilisé dans une installation de production stérile. Qu’elle soit réalisée en interne ou dans un laboratoire sous contrat, une planification minutieuse, une attention rigoureuse aux détails et beaucoup de discernement sont toujours nécessaires pour obtenir un résultat positif et éviter les nombreux problèmes et difficultés que ces études peuvent engendrer.

Références

1. USP 37 Ch Disinfectants and Antiseptics.
2. Guidance de la FDA pour l’industrie, Produits pharmaceutiques stériles produits par fabrication aseptique – Bonnes pratiques de fabrication actuelles. Sept. 2004. p. 34.