Bizonyított módszerek a fertőtlenítőszerek hatékonyságának tesztelésére

Összefoglalás

Az fertőtlenítőszerek és sporizidok elengedhetetlenek a mikrobiális szennyeződések ellenőrzésében a gyógyszeriparban, a biotechnológiai és orvostechnikai eszközgyártásban. A GMP-gyártóhelyek elvárják, hogy a helyszílspecifikus készítési módszerekkel, amelyek a szabványos eljárásokban le vannak írva, demonstrálják, hogy a kontrollált környezetben használt biocidek hatékonyak az általuk reprezentatív felületeken az üzemükben. Ebben a cikkben bemutatjuk a gyakori problémákat, amelyeket a hatósági ellenőrök kifogásolhatnak, valamint a fertőtlenítőszerek és sporizidok kvalifikációjában felmerülő nehézségeket, továbbá ismertetjük az in-vitro hatékonysági tesztek végrehajtásának esetleges problémáit.

Fertőtlenítőszerek kvalifikációja1

1. In-vitro -teszt

A laboratóriumi teszt, amely megmutatja a kiválasztott vegyszerek hatékonyságát az üzemre jellemző reprezentatív felületeken az üzem környezetében lévő izolátumok ellen.

2. In-situ teszt

Statisztikai összehasonlítás az izolációk gyakorisága és a mikroorganizmusok száma között, amelyeket az új fertőtlenítőszer alkalmazása előtt és után izoláltak (az adatok a környezet felügyeletéből származnak).

Miért kell kvalifikálni a fertőtlenítőszereket?

- A hatóságok elvárják, hogy megbízható tisztítási és fertőtlenítési program részeként alkalmazzák – A fertőtlenítőszerek és eljárások alkalmasságát, hatékonyságát és korlátait értékelni kell ("The suitability, efficacy, and limitations of disinfecting agents and procedures should be assessed").2

- Az EPA-nyilvántartási követelmények nem határozzák meg, hogyan használhatók ezek a gyógyszeriparban, biotechnológiában és orvostechnikai eszközgyártásban.

FDA 483/ Figyelmeztető levél kategóriák

- Nincs adat a használt biocidek alkalmasságáról

- Környezeti izolátumok nem szerepelnek a tesztben

- A tesztkouponok nem reprezentatívak a steril kezelési területen lévő padlók, falak és munkafelületek számára, beleértve a kopott vagy sérült felületeket

- Nincs adat a felhasználási oldatok lejárati idejéről (pl. tartási idő)

- Nincs adat a kontaktidő meghatározására (a láthatóan nedves felületekkel való kontaktidőnek az üzem szabványos eljárásaiban megadott időn belül kell lennie)

Újra kvalifikáció

- Évente felül kell vizsgálni a kockázatokat és az esetleges változásokat

- Újra kvalifikáció szükséges lehet az alábbi esetekben:
• Új fertőtlenítőszerek bevezetése
• A környezet mikrobiológiai száma változott és/vagy rezisztens organizmusokat izoláltak (pl. B. cereus)
• Új felületeket alakítottak ki
• Kritikus paraméterek változtak a fertőtlenítőszer használatában

In-vitro teszt

A nem megfelelés leggyakoribb okai:

Általános:

- Biocidek tesztelése nem megfelelő mikroorganizmusok ellen
- Nem megfelelő módszerek alkalmazása
- Elégtelen tervezés
- Nem megfelelő kontaktidő

Neutralizálás:

- Nem megfelelő neutralizálás
- A neutralizátor toxicitása

Inokulum:

- Alacsony életképességű inokulum szuszpenziók
- Hibásan elkészített gombaspóraszuszpenziók és baktériumspóraszuszpenziók

Felületek:

- Porózus felületek
- A tesztkouponok nem hozzáférhetők a gőzsterilizáláshoz
- Egyenetlen inokulálás vagy termékfedés a felületi gödrök vagy felületi feszültség miatt

Visszakeresés:

- Száradás utáni elpusztulás (pl. P. aeruginosa)
- Szándékosan túl magas log-redukciós célok kitűzése
- A végleges lemezek nem számlálhatók
- A visszakeresési módszer nem validált

Fontos szempontok a nem megfelelés elkerülése érdekében

Általános

- Olvassa el a termékcímkéket, hogy megértse az egyes termékek állításait és korlátozásait (pl. hatékonysági állítások és kontaktidők).

- A célorganizmusoknak megfelelő vegyszertípust alkalmazzon (pl. ne használjon 70% IPA-t vagy quats-t baktériumendosporák ellen).

- Az AOAC módszerek nem alkalmasak ezekre a tesztekre (bár néhány eljárás, mint az inokulum és spóraszuszpenziók készítése, hasznos lehet).

- Az ASTM E2197 és az EN-13697 módszerek értékes betekintést nyújtanak a kvantitatív felületi tesztekbe.

- Fizikai eltávolítást és kémiai lebontást ne kombináljon egy vizsgálatban.

- A belső szabványos eljárásokban megadott lejárati dátumokat vegye figyelembe a vizsgálat során.

- A következetesség elengedhetetlen a sikerhez.

- Az előzetes tervezés rendkívül fontos, és néhány kísérleti teszt elvégzése szükséges lehet.

Neutralizálás

- A neutralizálási módszert validálni kell.

- A neutralizátor hatékonyságát és toxicitását tesztelni kell.

- A vizsgálat megkezdése előtt néhány próbát és kísérletet el kell végezni.

- Nincs univerzális neutralizátor minden fertőtlenítőszertípushoz.

Inokulum

- Baktérium szuszpenziókat 18-24 órás kultúrákból készítsen, és azonnal injektálja a felületekre; ne használja több napig.

- Gombaspóraszuszpenziót a teszteléshez és a spóramennyiség ellenőrzéséhez használjon, mivel a hyphák/nyálkák megakadályozhatják, hogy a biocid elérje és áthatoljon a spórákon.

- A baktériumspóraszuszpenziót a javasolt módszer szerint, például az AOAC szerint készítse, ≥90% spórával.

Felületek

- A kisebb tesztkouponok (1–2 cm) könnyebben kezelhetők és neutralizálhatók.

- A maradványokat 70%-os IPA-val távolítsa el.

- Alternatív sterilizálási módszereket alkalmazzon (pl. VHP®, száraz hő), ha a felületeket nem lehet autoklávval sterilizálni.

Visszakeresés

- A visszakeresési módszert validálni kell.

- A hanghullámok segíthetik a visszakeresést.

- A megfertőzött tesztkouponokat a lehető legrövidebb ideig szárítsa, és azonnal tesztelje.

- A visszakeresési módszert a formális tesztek megkezdése előtt értékelje kísérleti tanulmányokban.

Záró megjegyzés

A fertőtlenítőszerek kvalifikációja kritikus lépés a fertőtlenítési folyamat validálásában, amely steril gyártóhelyen kerül alkalmazásra. Függetlenül attól, hogy az in-vitro tesztet belső vagy szerződéses laboratóriumban végzik, a problémák és nehézségek elkerülése érdekében mindig alapos tervezés, részletekre való odafigyelés és körültekintő hozzáállás szükséges a pozitív eredmény eléréséhez.

Irodalom

1. USP 37 Ch Disinfectants and Antiseptics.
2. FDA Guidance for Industry, Sterile Drug Products Produced by Aseptic Manufacturing – Current Good Manufacturing Practice. Szeptember 2004. 34. oldal.