Chi dice A dovrebbe anche dire B

Panni tipici per la pulizia delle camere bianche per diverse applicazioni.

Nel settore dell'industria farmaceutica si presta particolare attenzione da tempo al livello di endotossine di prodotti e materiali di consumo, soprattutto tra i produttori di parenterali e impianti. Ad esempio, il contenuto di endotossine di guanti e sostanze chimiche di processo come WFI (acqua per iniezioni) deve essere regolarmente controllato e il processo di produzione validato. Anche nel settore della pulizia delle camere sterili questa tematica riceve maggiore attenzione, come dimostra l'uso crescente di WFI nella produzione di detergenti e disinfettanti. I produttori di prodotti detergenti soddisfano tali requisiti attraverso processi di produzione validati e certificati, garantendo agli utilizzatori livelli definiti di endotossine nei loro prodotti, e anche i fornitori di panni per la pulizia hanno riconosciuto questa esigenza, sviluppando prodotti appositamente ottimizzati per l'uso con altri prodotti a ridotto contenuto di endotossine. È evidente che attualmente vengono impiegati molto più guanti e fluidi detergenti a ridotto contenuto di endotossine rispetto ai panni per la pulizia corrispondenti. Ciò porta alla supposizione che, in molti casi, si perseguano processi di pulizia a ridotto contenuto di endotossine, anche se tali processi non sono ancora applicati in modo coerente.

Le endotossine sono componenti della membrana cellulare esterna dei batteri Gram-negativi e sono costituite da lipopolisaccaridi. Non vengono prodotte dai batteri per il rilascio, ma sono presenti in vivo sulla superficie dei batteri Gram-negativi o vengono rilasciate durante la morte dei batteri come parti di tralci cellulari. La loro rilevanza medica risiede nella proprietà fisiologicamente attiva di provocare reazioni immunitarie come febbre o infiammazioni quando entrano nel corpo umano. Le endotossine appartengono quindi al gruppo dei pyrogeni, e spesso nei documenti si usano i termini pyrogeno ed endotossina come sinonimi. Oltre ai farmaci somministrati per via parenterale, esistono limiti di tolleranza per i prodotti medici che, in contatto con fluidi corporei durante l'uso previsto, devono rispettare valori massimi di contaminazione. Questi sono espressi in EU (Unità di Endotossina) e, ad esempio, per il liquido cerebrospinale sono di 2,15 EU/Dispositivo e per la linfa/sangue di 20 EU/Dispositivo (Ph. Eur. 2.6.14 e USP Chapter 85). In ordine decrescente, si applicano altri limiti per il contatto con organi interni, apparato digerente e contatto con la pelle. La definizione di tali limiti è affidata, tra gli altri, alla farmacopedia europea e americana.

Per determinare le EU secondo le suddette farmacopie (Ph. Eur. 2.6.14 e USP Chapter 85), gli utenti e i produttori possono scegliere tra diverse metodologie di prova tramite il test LAL. Per questo test di lisato di amebociti di Limulus viene generalmente utilizzato un lisato derivato dai componenti ematici (amebociti) del cavalluccio marino, che coagula a contatto con endotossine e permette, tramite una reazione turbidimetrica o colorimetrica, una determinazione quantitativa mediante un lettore di micropiastre. Questo metodo analitico approvato dalle farmacopie consente una rilevazione molto sensibile. L'utilizzo di questi animali come donatori non comporta sfruttamento delle risorse animali, poiché i cavallucci marini vengono rilasciati dopo l'estrazione del lisato e sono soggetti a controlli di popolazione. Come alternativa non approvata attualmente dalle farmacopee, da alcuni anni si utilizza anche un metodo di prova basato sulla tecnologia Ligand-Phage, prodotto biotecnologicamente senza componenti animali e valutabile tramite fluorescenza in un lettore di micropiastre.

Ma perché le endotossine sono critiche nell'industria farmaceutica? I prodotti impiegati vengono sterilizzati prima dell'uso. Purtroppo, le endotossine sono estremamente robuste e sopravvivono a sterilizzazioni con vapore ad alta temperatura e anche a radiazioni gamma. Solo con calore secco o alte dosi di radiazioni gamma si può ridurre il livello di endotossine, anche se diverse pubblicazioni riportano valori differenti sul grado di riduzione possibile. Tuttavia, molti prodotti non tollerano trattamenti di sterilizzazione così rigidi senza danni, e devono essere trovate alternative per la rimozione successiva. Per liquidi come WFI o disinfettanti, l'ultrafiltrazione tramite filtri positivamente caricati e l'uso di filtri a carbone attivo offrono ulteriori possibilità di rimozione delle endotossine. Sulle superfici solide, dove le endotossine si sono fissate essiccate, la rimozione è molto più difficile. Si consiglia, ad esempio, un trattamento a caldo secco a +200°C per oltre 5 ore o un bagno di 15 ore in soluzione di soda caustica a 1 molarità.

Poiché la quantità di endotossine in o su un prodotto dipende in certa misura dal numero totale di microrganismi e la loro rimozione o distruzione successiva su superfici solide è evidentemente difficile, la chiave per il controllo del livello di endotossine risiede nella riduzione coerente del carico microbico durante tutto il processo di produzione. Per la produzione di panni per la pulizia, ciò significa verificare e validare la purezza microbiologica di tutti i passaggi di processo e dei materiali impiegati. I panni prodotti con queste procedure vengono commercializzati come "senza endotossine", anche se ciò non implica l'assenza completa di endotossine, ma il rispetto dei limiti stabiliti dalle farmacopie. Recentemente sono disponibili diversi panni che rispettano il limite più severo finora stabilito per il contatto con liquido cerebrospinale, pari a 2,15 EU/pezzo (0,06 EU/ml secondo USP Chapter 161). In base alle diverse esigenze di resistenza all'abrasione, sono disponibili sia panni in viscosa/poliestere non tessuto sia tessuti di poliestere puro, come versioni a ridotto contenuto di endotossine.

Per la pulizia di aree sterili con elevata sensibilità alle endotossine, ora è possibile stabilire processi di pulizia sicuri con prodotti detergenti a ridotto contenuto di endotossine, senza dover affrontare il rischio di contaminazione dal panno di pulizia sulla superficie.