Kdo říká A, měl by také říct B

Typické čistící utěrky do čistých prostor pro různé použití.

V oblasti farmaceutického průmyslu je již dlouhou dobu věnována zvláštní pozornost endotoxinové zátěži produktů a spotřebního materiálu, zejména u výrobců parenterálních přípravků a implantátů. Například u rukavic a chemikálií používaných ve výrobním procesu, jako je WFI (voda pro injekce), je pravidelně kontrolován obsah endotoxinů a validován výrobní proces. Také v oblasti čištění sterilních prostorů je toto téma stále více sledováno, což se odráží v častějším používání WFI při výrobě čisticích a dezinfekčních prostředků. Výrobci čisticích produktů splňují požadavky prostřednictvím validovaných a certifikovaných výrobních postupů a zajišťují uživatelům definované limity endotoxinové zátěže svých produktů, a také dodavatelé čisticích utěrek si tento požadavek uvědomili a vyvinuli odpovídající produkty, které jsou optimalizovány pro použití s jinými produkty s redukovaným obsahem endotoxinů. Zajímavé je, že v současnosti je používáno výrazně více rukavic a čisticích kapalin s redukovaným obsahem endotoxinů než odpovídajících čisticích utěrek. To vede k domněnce, že v mnoha případech jsou cílem procesy s redukovaným obsahem endotoxinů, ale tyto procesy ještě nejsou důsledně implementovány.

Endotoxiny jsou složkami vnější membrány gramnegativních bakterií a skládají se z lipopolysaccharidů. Nejsou vytvářeny bakteriemi za účelem uvolnění, ale u gramnegativních bakterií se v in vivo vyskytují buď na povrchu nebo jsou při odumírání bakterií uvolňovány jako části buněčných trámců. Jejich lékařský význam spočívá v jejich fyziologicky aktivní vlastnosti, kdy při vstupu do lidského těla vyvolávají imunitní reakce, jako je horečka nebo záněty. Endotoxiny tedy patří do skupiny pyrogenů, a často jsou v publikacích pojmy pyrogen a endotoxin používány jako synonyma. Kromě parenterálně podávaných léků existují pro zdravotnické produkty, které přicházejí do styku s tělesnými tekutinami při svém určeném použití, limity maximální přípustné zátěže. Ty jsou uváděny v EU (Endotoxin Units) a například pro mozkomíšní mok je stanoven limit 2,15 EU/zařízení a pro lymfu/krv je to 20 EU/zařízení (Ph. Eur. 2.6.14 a USP Chapter 85). V klesajícím pořadí platí další limity pro kontakt s vnitřními orgány, trávicím traktem a kontaktem s kůží. Pro stanovení těchto limitů jsou odpovědné například evropská a americká farmakopea.

Pro stanovení EU podle výše uvedených farmakopeí (Ph. Eur. 2.6.14 a USP Chapter 85) mají uživatelé a výrobci k dispozici různé testovací metody pomocí LAL testu. Tento Limulus amebocyt lysát test používá obecně lysát z krevních složek (amébocytů) korýše křižáka, který při kontaktu s endotoxiny koaguluje, a umožňuje kvantitativní stanovení pomocí turbidimetrické nebo barevné reakce s pomocí mikropárového čtečky. Tato schválená analytická metoda farmakopeemi umožňuje velmi citlivé detekce. Použití zvířat jako dárců neznamená vykořisťování zvířecých zdrojů, protože korýši jsou po získání lysátu opět vypuštěni a populace jsou pod kontrolou. Jako alternativu, která není aktuálně schválena farmakopeemi, se již několik let používá test založený na technologii fágových ligandů, který je biotechnologicky získaný, neobsahuje žádné zvířecí složky a je vyhodnocován pomocí fluorescence v mikropárové čtečce.

Proč jsou však endotoxiny v farmaceutickém průmyslu kritické? Produkty, které se používají, jsou přece sterilizovány před použitím. Bohužel jsou endotoxiny velmi odolné a přežívají jak parní sterilizaci, tak gama záření relativně bez poškození. Teprve suché teplo nebo vysoké dávky gama záření mohou snížit jejich zátěž, přičemž různé publikace uvádějí odlišné údaje o míře možného snížení. Často však produkty takovou přísnou sterilizační léčbu snášejí špatně, a je třeba hledat alternativy k následnému odstranění. U tekutin, jako je WFI nebo dezinfekční prostředky, nabízí ultrafiltrace přes pozitivně nabité filtry a použití aktivních uhlíkových filtrů další možnosti oddělení endotoxinů. Na pevných površích, kde jsou endotoxiny vysrážené a usazené, je jejich odstranění mnohem složitější. Doporučuje se například suchá teplotní léčba při +200°C po dobu 5 hodin nebo 15hodinová lázeň v 1 molární hydroxidu sodném.

Protože množství endotoxinů v nebo na produktu závisí do jisté míry na celkovém počtu mikroorganismů a jejich následné odstranění nebo zničení na pevných površích je zjevně složité, klíčem ke kontrole endotoxinové zátěže je důsledné snižování mikrobiálního počtu během celého výrobního procesu. U výroby čisticích utěrek to znamená kontrolu a validaci mikrobiální čistoty všech výrobních kroků a použitých procesních prostředků. Tyto čisticí utěrky, vyrobené těmito metodami, jsou sice uváděny na trh jako „bez endotoxinů“, což však neznamená úplnou absenci všech endotoxinů, ale že jsou dodrženy limity stanovené farmakopejemi. Nedávno jsou k dispozici různé čisticí utěrky, které splňují dosud nejpřísnější limit pro kontakt s mozkomíšní mokem 2,15 EU/kus (0,06 EU/ml podle USP Chapter 161). Přizpůsobené různým požadavkům na oděruvzdornost jsou k dispozici jak utěrky z viskózové/polyesterové netkané textilie, tak čisté polyesterové tkaniny, jako verze s redukovaným obsahem endotoxinů.

U čištění sterilních prostor s vysokou citlivostí na endotoxiny lze nyní zavést bezpečné čisticí procesy s produkty s redukovaným obsahem endotoxinů, aniž by bylo nutné podstupovat riziko kontaminace přenosem z čisticí utěrky na povrch.