Quien dice A, también debe decir B

Paños de limpieza de salas limpias típicos para diferentes aplicaciones.

En el sector de la Industria Farmacéutica, especialmente en los fabricantes de parenterales e implantes, se ha prestado atención durante mucho tiempo a la carga de endotoxinas en productos y materiales de consumo. Por ejemplo, en guantes y productos químicos de proceso como WFI (agua para inyecciones), se debe verificar regularmente el contenido de endotoxinas y validar el proceso de fabricación. También en el área de limpieza de salas estériles, este tema ha adquirido mayor importancia, lo que se refleja en el uso creciente de WFI en la fabricación de productos de limpieza y desinfección. Los fabricantes de productos de limpieza cumplen con los requisitos mediante procesos de fabricación validados y certificados, garantizando a los usuarios límites definidos de endotoxinas en sus productos, y también los proveedores de paños de limpieza han reconocido esta necesidad y desarrollado productos adecuados, optimizados para su uso con otros productos con reducción de endotoxinas. Es llamativo que actualmente se utilizan claramente más guantes y líquidos de limpieza con reducción de endotoxinas que paños de limpieza correspondientes. Esto lleva a la suposición de que en muchos casos se buscan procesos de limpieza con reducción de endotoxinas, pero estos procesos aún no se implementan de manera coherente.

Las endotoxinas son componentes de la membrana celular externa de las bacterias gram-negativas y están formadas por lipopolisacáridos. No son producidas por las bacterias para su liberación, sino que en las bacterias gram-negativas se encuentran en la superficie in vivo o se liberan al morir las bacterias como parte de los restos celulares. Su relevancia médica se basa en su propiedad fisiológicamente activa de provocar reacciones inmunitarias como fiebre o inflamación al entrar en el cuerpo humano. Por lo tanto, las endotoxinas pertenecen al grupo de los pirógenos, y en muchas publicaciones los términos pirógeno y endotoxina se usan de manera sinónima. Además de los medicamentos administrados por vía parenteral, existen límites máximos de carga de endotoxinas para productos médicos que entran en contacto con fluidos corporales en su uso previsto. Estos límites se expresan en unidades de endotoxinas (EU) y, por ejemplo, para el líquido cefalorraquídeo son 2,15 EU/unidad y para linfa/sangre 20 EU/unidad (Ph. Eur. 2.6.14 y USP Capítulo 85). En orden decreciente, se establecen otros límites para el contacto con órganos internos, el aparato digestivo y la piel. La determinación de estos límites está a cargo, entre otros, de la farmacopea europea y la americana.

Para determinar las EU según las farmacopeas mencionadas (Ph. Eur. 2.6.14 y USP Capítulo 85), los usuarios y fabricantes disponen de varios métodos de prueba mediante la prueba LAL. Para esta prueba de lisado de amebocitos de Limulus, generalmente se utiliza un lisado de los componentes sanguíneos (amebocitos) del cangrejo herradura, que coagula en contacto con endotoxinas, permitiendo una determinación cuantitativa mediante una lectura en microplacas a través de una reacción turbidimétrica o de color. Este método analítico, aprobado por las farmacopeas, permite una detección muy sensible. El uso de estos animales como donantes no implica la explotación de recursos animales, ya que los cangrejos herradura se liberan después de obtener el lisado y las poblaciones están sujetas a controles. Como alternativa no aprobada actualmente por las farmacopeas, desde hace algunos años se emplea también un método de prueba basado en la tecnología de ligantes de fagos, que se obtiene biotecnológicamente, sin componentes animales y que se puede evaluar mediante fluorescencia en una lectura de microplacas.

¿Pero por qué son las endotoxinas críticas en la industria farmacéutica? Los productos utilizados se esterilizan antes de su uso. Lamentablemente, las endotoxinas son extremadamente resistentes y sobreviven a esterilizaciones por vapor de agua y a la radiación gamma sin daños significativos. Solo mediante calor seco o dosis elevadas de radiación gamma se puede reducir la carga de endotoxinas, aunque diferentes publicaciones ofrecen distintas cifras sobre el grado de reducción posible. Sin embargo, muchos productos no toleran tratamientos de esterilización tan rigurosos sin daños, por lo que se deben buscar alternativas para su eliminación posterior. Para líquidos como WFI o desinfectantes, la ultrafiltración mediante filtros cargados positivamente y el uso de filtros de carbón activado ofrecen una opción adicional para eliminar endotoxinas. En superficies sólidas donde las endotoxinas se han secado y fijado, su eliminación es mucho más difícil. Se recomiendan, por ejemplo, un tratamiento con calor seco a +200°C durante 5 horas o un baño de 15 horas en una solución de hidróxido de sodio molar.

Como la cantidad de endotoxinas en un producto o en su superficie depende en cierta medida del recuento total de microorganismos, y la eliminación o destrucción posterior en superficies sólidas resulta claramente difícil, la clave para controlar la carga de endotoxinas radica en la reducción constante del recuento microbiano durante todo el proceso de fabricación. Para la fabricación de paños de limpieza, esto implica verificar y validar la pureza microbiológica en todas las etapas del proceso y en los medios utilizados. Los paños de limpieza producidos con estos métodos se comercializan como "libres de endotoxinas", aunque esto no significa la ausencia total de endotoxinas, sino que cumplen con los límites establecidos por las farmacopeas. Recientemente, están disponibles varios paños que cumplen con el límite más estricto para contacto con líquido cefalorraquídeo, de 2,15 EU/paño (0,06 EU/ml según USP Capítulo 161). Adaptados a diferentes requisitos de resistencia al roce, existen tanto paños de viscosa/poliéster como tejidos de poliéster puro, en versiones con reducción de endotoxinas.

En la limpieza de áreas estériles con alta sensibilidad a endotoxinas, ahora se pueden establecer procesos de limpieza seguros con productos de limpieza con reducción de endotoxinas, sin tener que preocuparse por el riesgo de transferencia de contaminación del paño de limpieza a la superficie.