Mikrobiológiai higiéniai monitorozás a tisztatérben és az izolátorban

Mikrobiológiai higiéniai monitoring a tisztatérben és az izolátorban

A tisztasági szobák és izolátorok egyre fontosabb szerepet töltenek be az iparban. Számos ágazatban és létesítményben már ideiglenesen is sok terméket gyártanak tisztaterekben vagy izolátorokban. Az ebből származó előnyök a termékminőség javításában nyilvánvalóak. Egyidejűleg ezek az intézkedések jobb személyvédelemhez is vezetnek. A higiéniai célok szigorú betartásának érdekében a levegő és a felületek mikrobiológiai ellenőrzését is szigorúan kell kontrollálni.

Ágazatok és létesítmények, ahol tisztaterek és izolátorok használatosak:
- Gyógyszeripar
- Élelmiszeripar
- Kozmetikai ipar
- Kutatóintézetek
- Kórházak (műtő, intenzív osztály)

Mikrobiológiai levegőminőség-ellenőrzés

A különböző hatósági előírások és az ehhez kapcsolódó szabványok (EU-GMP, ISO, USP, FDA) mellett természetesen minden üzemvezető érdeke, hogy aktuális információkkal rendelkezzen a levegő higiéniai állapotáról.

A VDI 6022 (Higiéniai követelmények a helyiségtechnikai berendezéseknél gyártási, irodai és gyűléstermekben) például arra hívja fel a figyelmet, hogy a jó levegőminőség nemcsak az alkalmazottak általános közérzetéhez járul hozzá, hanem döntő hatással van a termékek minőségére is a gyártás során.

Speciális eszközöket fejlesztettek ki a levegőben lévő mikroorganizmusok koncentrációjának ellenőrzésére, amelyek különleges kialakításuk révén lehetővé teszik, hogy akár ≥1mm részecskéket is gyűjtsenek. A levegő mikrobiológiai gyűjtésének módszeréül az Andersen Air Sampler elve vált elfogadottá. Ebben a módszerben a beszívott levegő a benne lévő részecskéket egyre növekvő sebességgel a 6 egymás fölötti agar tányérra lövellik, amelyek egyben tápanyagként is szolgálnak. A részecskék és azokhoz tapadó kórokozók így méretük szerint szétválogatódnak a kijelölt felületen.

Mobil levegőmikrobiológiai gyűjtőberendezés

A MAS-100 NTÔ egy hordozható levegőmikrobiológiai gyűjtőberendezés, melynek háza erős eloxált alumíniumból készült, és az Andersen Air Sampler impulziós elvén alapul. A levegőt egy autoklávozható perforált fedőn keresztül szívja be. A szelektív gyorsító hatású légáramlás, amely részecskéket és kórokozókat tartalmaz, az agar tányér felületére irányul. A mintavétel után a tápanyagot tartalmazó tányért beoltják, a kolonákat megszámolják, és össz mikrobiális számmal (GKZ) értékelik. Mivel ez a közvetlen módszer nem igényel szűrőműveleteket, a mintavétel egyszerűsödik, és gyakorlatilag kizárható a szekunder szennyeződés.

A MAS-100 NTÔ folyamatos térfogatméréssel működik egy beépített tömegszabályozó szenzor segítségével, biztosítva a 100 liter/perc állandó légáramlást. Ha a légáramlás külső tényezők miatt nem egyenletes, vagy a túlcsordult petriszállal megszakad vagy csökken, az eszköz automatikusan szabályozza a levegő mennyiségét. A levegő mikrobiológiai méréséhez például a gyógyszeriparban az előírásoknak megfelelően legfeljebb 1.000 liter gyűjtési térfogat ajánlott.

A standard módszeren túl a MAS-100 NTÔ lehetővé teszi szekvenciális levegőmintavételt (SQS). Például 1.000 liter levegő több órán keresztül, bármilyen megszakítással átirányítható egy tápanyag-tápanyagra. A módszerhez egy 90 mm-es standard petriszállal vagy egy érintőlemez alkalmazható.

A MAS-100 NTÔ készüléken egy nagy megvilágított kijelzőn öt különböző térfogat és automatikus indítási késleltetés állítható be. A mintavétel során folyamatosan látható a gyűjtött térfogat és a hátralévő idő. A jelenlegi beállítások (térfogat, dátum, idő, felhasználó) a készülék mintalistájában tárolódnak, és a kijelzőn vagy számítógépen is láthatók. Hibás mintavétel esetén a rendszer riasztási listába kerül, és a fent leírt módon megtekinthető. A kijelzőn megjelenő pontos kalibrálási emlékeztető megakadályozza a határidő túllépését. A készülékeket helyszíni szerviz végzi automatikus kalibrációval, amely pontos és személyektől független reprodukálható eredményt garantál.

A MAS-100 NTÔ akkumulátoros változata újratölthető lítium-ion akkumulátorral van felszerelve, amely 50.000 liter kapacitású, és 7-8 órás működést biztosít. Szükség esetén hálózatról is működtethető. Robbanásveszélyes környezetben történő levegőmikrobiológiai gyűjtéshez külön robbanásbiztos MAS-100 NT® Ex készülék áll rendelkezésre.

A készülékek kiválóan alkalmasak lamináris áramlás mellett történő alkalmazásra, mivel a levegő beszívási sebessége a perforált fedőn 0,45 m/sec, ezáltal elkerülve a levegő torlódását. A perforált fedőn (300x0,6 mm lyukak) keresztül a részecskék és mikroorganizmusok becsapódási sebessége az agar felületen <20 m/sec. Ez legalább az Andersen Air Sampler 5. fokozatát biztosítja. Ezzel a légsebességgel garantált, hogy a részecskék ≥1 µm visszatartódnak az agar tányéron.

Az összes MAS-100Ô készülék megfelel az ISO 14689 I. és II. része, valamint a GAMP 4.0 irányelveinek, és teljes körűen validáltak.

A legújabb MAS-100 NTÔ kommunikációs és kalibrációs szoftverrel akár 10 felhasználói nevet (felhasználót) is meg lehet határozni. Ez a működési mód hibamentes és automatikus dokumentációt garantál minden mintavételről, és az utolsó 100 adatot át lehet vinni egy számítógépre. A petriszállák értékelése a megfelelő protokollok szabad oszlopába kerül. Az integrált átváltótábla (Feller) automatikusan korrigálja a tényleges koloniaszámot az adott levegőmennyiségre vonatkozóan.

Állandó levegőmikrobiológiai rendszer a tisztatér és izolátor számára

Egyre több gyártási folyamat a gyógyszer- vagy kozmetikai ágazatban, valamint az élelmiszeriparban is, higiénikus szempontból különösen kifogástalan körülmények között zajlik. Ennek oka a termékekre vonatkozó magasabb követelmények, mint például a GMP, HACCP, DIN ISO szabványok vagy a tartósítószerek mellőzése.

A MAS-100 ISO NT® rendszer egy állandó beépítésre tervezett változata a mobil MAS-100 NTÔ levegőmikrobiológiai gyűjtőnek, és már korábban ismertetett műszaki jellemzőkkel rendelkezik:
- Levegő áramlási sebesség 100 liter/perc
- 90 mm-es petriszállal működik
- Beépített tömegszabályozó szenzor
- Szétszedhető mintavétel meghatározott időtartamra
- Öt különböző térfogat egyedileg beállítható

A tisztaterek és izolátorok anyagbeviteli szennyeződésének minimalizálása érdekében olyan koncepció alakult ki, amelyben a gyűjtőfejet, általában rozsdamentes acélból, fix helyre szerelik be a tisztatérben vagy izolátorban. A gyűjtőfejhez egyenként csatlakozó elektronika, általában rozsdamentes acélcső vagy H2O2-álló tömlő segítségével, a MAS-100 ISO NT® rendszer mechanikus alkatrészei pedig a kritikus területen kívül kerülnek felszerelésre. Hosszú beszívócsövek vezetése a központi vákuumszivattyúhoz nem szükséges.

Speciális kettős szelep egység és külön szivattyú lehetővé teszi a gyűjtőfej és a levegő beszívócső integrálását az izolátor sterilizációs folyamatába anélkül, hogy manipulációra lenne szükség. Az automatikus szelepvezérlés megakadályozza, hogy nyomáscsökkenés esetén külső levegő jusson be a térbe.

A kezelést és a releváns paraméterek kiválasztását beépített kijelző teszi lehetővé. A mintavétel indítása közvetlen indító gombbal történhet, miután az agar tányért behelyezték a gyűjtőfejbe. További vezérlési, indítási és adatkommunikációs lehetőséget biztosítanak a csatlakozók és modulok, mint például USB, RS232/485, Profibus és Ethernet.

A MAS-100 ISO NT® rendszer ugyanazzal a funkcióval elérhető RABS-verzióként is, sterilizációs ciklus nélkül.

A MAS-100 ISO NT® rendszerhez egy speciális kommunikációs és kalibrációs szoftver jár, amely akár öt hozzáférési szintet és az egyedi programozást tesz lehetővé (Windows 95 és újabb). 100 mintázási és riasztási napló tárolható, és akár kilenc MAS-100 ISO NT® rendszer is csatlakoztatható egy számítógéphez. Ezáltal a mikrobiológus mindig áttekintést kaphat a levegőmikrobiológiai mintavételekről.

A MAS-100 ISO NT® rendszer teljes mértékben validált.

Nyomás alatt lévő gázok mikrobiológiai mintavétele

A EN ISO 14698-1 szerint a nyomás alatt lévő gázokat rendszeresen mikroorganizmusok jelenlétére kell vizsgálni. Normál vagy steril munkakörnyezetben a levegőmikrobiológiai gyűjtőberendezések már általánosan alkalmazottak. A tömörített gázokat fizikai problémák miatt vagy nem megfelelő eszközökkel, vagy egyáltalán nem vizsgálják kórokozók szempontjából.

A kiváló elemek, mint például az ütközési elv (impaktálás) alkalmazása standard 90 mm-es petriszállal, valamint a könnyű kezelhetőség és a teljesen automatikus gyűjtési folyamat nyomás alatt, kényelmes megoldást jelentenek a MAS-100 CGÔ Ex készülék számára ezen alkalmazásban.

A nyomás alatti mintavétel biztosítja, hogy a mikroorganizmusok nem pusztulnak el hirtelen nyomáscsökkenés miatt. Emellett nem szükséges további idő- és nyomásmérés.

A MAS-100 CGÔ Ex két szenzort használ, amelyek folyamatosan mérik a gáz tömegét és nyomását, és így tartják fenn a 50 vagy 100 liter/perc állandó áramlást, lehetőleg 1,5 és 10 bar közötti gáznyomás mellett. Ezután a gáz lassan dekompresszióra kerül.

A gyártásban leggyakrabban használt nyomásgázok, mint például levegő, szén-dioxid, nitrogén, oxigén és argon, előre programozva vannak a kiválasztáshoz. További öt gáz típus a felhasználó által meghatározható és gyárilag programozott a MAS-100 CGÔ Ex készülékben.

A akkumulátoros működés lehetővé teszi a MAS-100 CG Ex használatát anélkül, hogy elektromos hálózatra lenne szükség. Emellett robbanásveszélyes környezetben is biztonságosan alkalmazható az Ex-védelmi kialakítás miatt.

A speciális gyűjtőfej nyomáspróbázott, és sterilizálható azzal a fémfóliás vagy H2O2-álló tömlővel együtt.

A MAS-100 CGÔ Ex fontos követelményeknek felel meg a felhasználók biztonsága és az eredmények megbízhatósága érdekében:
- Beépített biztonsági túlnyomáscsap, > 10 bar
- Független nyomásjelző
- Villogó LED, ha a készülék nyomás alatt van
- Robbanásbiztos készülék
- Automatikus lassú gázdekompresszió
- Alacsony levegőáramlás figyelmeztetés
- Kalibrálható készülék

Mikrobiológiai higiéniai ellenőrzések felületeken

A levegőmonitoring mellett a mikrobiológiai felületi ellenőrzés is előírás a nemzeti és nemzetközi szabályozások (EU-GMP, USP, ISO, FDA) szerint. Az ellenőrzésbe be kell vonni például a HACCP rendszer kritikus ellenőrzési pontjait (CCP), a gyártási területeken (GMP) vagy védelmi zónákban (intenzív osztály, műtő).

- Termékkel érintkező felületek
- Padló
- Falak
- Ajtókilincsek
- Személyzet
- Textíliák
- Kesztyűk

Ezekhez a módszerhez a úgynevezett érintőlemez a választott módszer. Ezek a 55 mm-es petriszállák (25 cm² felület) konvexen öntött tápanyagot tartalmaznak, amelyet egy meghatározott idő (5-10 másodperc) után az ellenőrzött felületre nyomnak. Ezután a tányért visszazárják a fedéllel, és inkubátorban tenyésztik. A mintavételt elsősorban a teljes mikrobiális számban (GKZ) való meghatározásra javasolják, Casó-agar (kazein-szója pepton-agar) felhasználásával. A gombák és penészgombák kimutatására természetesen speciálisan összetett tápanyagokat is alkalmazhatnak.

A használt érintőlemezeket kettő- vagy háromszoros csomagolásban, gamma sugárzásnak kitéve és szobahőmérsékleten több hétig tárolhatók. Mivel a felületeken gyakran számítani lehet a fertőtlenítőszerek visszamaradó hatására, az inaktiválásuk érdekében a tápanyagokhoz ún. inaktiváló szereket adnak, például Tween, Lecithin, Hystidin és Na-thioszulfát keverékét.

A tápanyagok gyártóinak utasításait be kell tartani. A környezeti baktériumokat 24-68 órán át, 30°C-on inkubálják, a gombákat és penészgombákat pedig legalább 7 napon keresztül, 25°C-on. Az eredményként a kiválasztott koloniaszámokat 100 cm²-re számítják át.

(Eckart Baumgärtner, VWR International Darmstadt előadása, a Reinraum Lounge 2010 rendezvényen Karlsruhe-ben tartva) Kapcsolat: VWR International email: mibio@de.vwr.com vagy telefonon a 06151-3972-406