Limpieza de rotaciones – ¿Qué es y qué ventajas tiene?

¿Por qué debe limpiarse una sala limpia? ¿Qué es la limpieza rotativa y realmente se necesita? ¿Por qué hay tantas sustancias químicas diferentes y cómo funcionan? ¿Cuáles de ellas deberían usarse? Como responsable de Desarrollo Comercial de un proveedor de materiales consumibles para salas limpias, Rebecca Smith trata a diario con estas preguntas.
Para responder a estas preguntas, ha conversado con expertos, revisado una gran cantidad de información sobre las resistencias de los microorganismos y los mecanismos de acción de los desinfectantes, y estudiado los requisitos de limpieza en las diferentes clases de salas limpias.

Limpiar la sala limpia

La respuesta a la primera pregunta es: por supuesto, las salas limpias deben limpiarse. Aunque puedan parecer limpias, la mayoría de las partículas que se deben eliminar no son visibles a simple vista. Con el tiempo, partículas de suciedad, restos celulares y otras contaminaciones se acumulan en las superficies de la sala limpia y deben ser eliminadas. La norma DIN EN ISO 14644-1 define una sala limpia de la siguiente manera:
“Espacio en el que la concentración de partículas en el aire está controlada, diseñado y utilizado de modo que la cantidad de partículas introducidas o generadas en el espacio y que se depositan sea mínima, y en el que otros parámetros de pureza como temperatura, humedad y presión se controlan según sea necesario” [10].

Mediante la limpieza se reduce la acumulación de partículas en la sala limpia. La mejor técnica para limpiar una superficie en una sala limpia es la limpieza húmeda. Para ello, generalmente se usan paños humedecidos con una solución desinfectante o de limpieza. Al limpiar mecánicamente, se elimina una cierta cantidad de partículas de la superficie. Cuando el paño y la superficie están húmedos, la adhesión entre las partículas y la superficie se reduce, permitiendo eliminar más partículas.

Eliminación de microorganismos y buenas prácticas de fabricación según las directrices de la UE

¿Qué es exactamente la limpieza rotativa? Se refiere a la carga microbiana, es decir, la cantidad de microorganismos que viven en una superficie no esterilizada. La limpieza rotativa no solo busca eliminar suciedad, pelusas, restos celulares, etc., sino también matar la contaminación en forma de posibles organismos vivos. Al limpiar una sala limpia, sin duda, también se elimina parte de la colonización microbiana. Sin embargo, es poco probable que se eliminen todos los “seres vivos”, por lo que los microorganismos no eliminados deben ser exterminados.

Para reducir la carga microbiana en la sala limpia, se necesitan desinfectantes, es decir, productos químicos que puedan matar microorganismos. Probablemente, se deben usar dos o más de estos productos de forma alterna para eliminar todos los gérmenes. Este ciclo se llama rotación, de ahí el término limpieza rotativa.

En la directriz de buenas prácticas de fabricación para medicamentos humanos y veterinarios (EudraLex Volumen 4), Anexo 1 sobre la fabricación de medicamentos estériles, la UE establece en el punto 61:
“La descontaminación de áreas limpias es especialmente importante. Deben limpiarse a fondo según un programa escrito. Cuando se utilicen desinfectantes, se debe emplear más de una variedad. El área debe ser monitoreada regularmente para detectar el desarrollo de cepas resistentes” [6].

¿Por qué se debe usar más de un desinfectante? Para evitar que se desarrollen resistencias. Existen dos tipos de resistencia: resistencia natural y formación de cepas resistentes mediante selección.

Formación de cepas resistentes mediante selección

En organismos como MRSA, se ha podido seguir cómo funciona el desarrollo de resistencia genética. Una bacteria que inicialmente podía ser eliminada con meticilina, con el tiempo desarrolló resistencia genética, y este antibiótico ya no funciona contra ella. Se piensa que lo mismo podría ocurrir con la eficacia de los desinfectantes contra microorganismos en salas limpias.

Con el tiempo, bacterias que anteriormente eran sensibles a alcoholes podrían desarrollar resistencia genética a estos productos, haciendo que la desinfección con alcohol ya no sea efectiva. Por ello, parece recomendable prevenir este efecto usando varios desinfectantes. Hasta ahora, no hay evidencia concreta de que esto ocurra o sea posible, pero se deben tomar precauciones.

Las condiciones que favorecieron el desarrollo de MRSA y las condiciones en una sala limpia difieren. Para que se desarrolle resistencia, en términos simplificados, algunos pocos bacterias deben sobrevivir a la aplicación de un determinado producto efectivo contra ellas. Estas pueden multiplicarse y transmitir la ventaja que les permitió sobrevivir a otros, perpetuando la resistencia. La cepa que sobrevive crece y se desarrolla.

En la siguiente limpieza, solo sobrevivirán unos pocos de estos microorganismos, que se multiplicarán nuevamente, y la ventaja de supervivencia se transmitirá y se fortalecerá. Si se usa siempre el mismo producto, este proceso se repetirá muchas veces. La ventaja será cada vez mayor, hasta que la cepa sea completamente resistente al producto. Dado que en entornos de salas limpias se realiza una limpieza excesivamente frecuente y con productos muy potentes, sobreviven muy pocos microorganismos. Por ello, es poco probable que se desarrollen cepas resistentes por selección. Además, los antibióticos tienen un mecanismo de acción muy específico y dirigido, lo que hace que la selección sea más probable. Los desinfectantes, en cambio, tienen un espectro de acción amplio, por lo que la selección es menos probable.

La formación de cepas resistentes por selección es un proceso de desarrollo gradual. La resistencia no es una característica innata del organismo. Esto diferencia esta forma de resistencia de la resistencia natural.

Resistencia natural

La resistencia natural se basa en el hecho de que diferentes desinfectantes actúan de distintas maneras. No todos son igualmente efectivos contra todos los organismos. Algunos son muy efectivos contra bacterias, pero no contra hongos; otros contra virus, pero no contra endosporas.

Debido a los diferentes mecanismos de acción de los desinfectantes, algunos microorganismos están por naturaleza mejor protegidos contra ellos. Esta característica no se aprende, no se selecciona ni se hereda genéticamente, sino que está en la estructura del microorganismo mismo. Un ejemplo claro: que las personas altas tengan más facilidad para jugar al baloncesto que las bajas no se debe a que hayan aprendido o entrenado, sino a su tamaño corporal.

Mecanismos de acción de los desinfectantes

Los desinfectantes a base de alcohol son efectivos contra la mayoría de los microorganismos, pero no contra endosporas. Actúan mediante la desnaturalización de proteínas en la célula, provocando que se agrupen y pierdan su función. Esto lleva a la pérdida de estructura y colapso de la célula.

Las sales de amonio cuaternario (QAV o cuats) actúan dañando la membrana celular, haciendo que componentes internos salgan y se descompongan. Son efectivas contra bacterias, virus envueltos y hongos, pero apenas contra virus no envueltos y endosporas.

Los biguanidas alteran la permeabilidad de la membrana celular. Dañan las capas externas y atacan las internas, provocando también la salida de componentes celulares. Su efecto es similar al de las QAV.

El cloro es un potente oxidante. Oxida el ADN y las proteínas celulares, destruyendo su actividad. Los desinfectantes a base de cloro matan casi todo a altas concentraciones, incluyendo endosporas.

El peróxido de hidrógeno es altamente reactivo y actúa oxidando, formando radicales hidroxilo libres que atacan componentes celulares esenciales. Los desinfectantes a base de peróxido de hidrógeno matan todo, incluyendo endosporas, pero también pueden dañar las superficies a limpiar.

De la forma en que actúan las biguanidas sobre la pared y la membrana celular, se deduce que estos productos no son muy efectivos contra microorganismos con paredes celulares muy resistentes. Estos microorganismos tienen una resistencia natural a la acción de las biguanidas.

Endosporas

Las endosporas son extremadamente difíciles de eliminar. Son un estadio de ciertos bacterias o virus que adoptan en condiciones adversas, como falta de nutrientes, agua, cambios de temperatura o pH. Se forma una cubierta extremadamente resistente alrededor del núcleo y los elementos esenciales. Este estado puede durar largos períodos hasta que las condiciones vuelvan a ser favorables. Entonces, la cubierta se vuelve permeable y la célula vuelve a estar activa.

Debido a esta cubierta resistente, las endosporas son muy difíciles de eliminar; resisten radiación gamma y muchos desinfectantes. Los desinfectantes a base de cloro o peróxido de hidrógeno actúan contra las endosporas y por eso a menudo se les llama esporicidas. El cloro aumenta la permeabilidad de la cubierta de la endospora, y el peróxido de hidrógeno puede romper proteínas en ella.

Espectro de acción

El uso de diferentes desinfectantes puede ampliar el espectro de acción, es decir, la proporción de microorganismos que pueden ser eliminados. El espectro de acción puede representarse como el espectro de ondas electromagnéticas. Si solo se considera la luz visible, se deja de lado una gran parte del espectro, ya que también existen rayos X y ultravioleta. De manera similar, si solo se usan desinfectantes que matan bacterias, no se actuará contra virus o endosporas. Por ello, al elegir desinfectantes, se deben considerar aquellos que cubran la mayor parte posible del espectro.

Si solo se usan productos que matan bacterias, pero no virus, se favorece aún más la proliferación de los virus. En un entorno tan favorable para los virus, incluso un desinfectante especialmente seleccionado dejará de ser efectivo contra ellos.

Selección de un desinfectante

¿Qué desinfectantes deberían usarse? Está claro que la utilización de un esporicida es muy importante, pero los desinfectantes esporicidas suelen ser tan fuertes que no se pueden usar a diario. Por ello, se recomienda alternar el uso del esporicida con otro desinfectante efectivo que sea más adecuado para uso regular. Además, sería recomendable usar un producto a base de alcohol, ya que actúa bien contra la mayoría de los gérmenes y también elimina restos de otros desinfectantes.

Resumen

Las salas limpias deben limpiarse para minimizar la acumulación de partículas según la norma DIN EN ISO 14644-1. La limpieza rotativa implica el uso alterno de diferentes desinfectantes para reducir la carga microbiana en la sala limpia.

Las directrices de la UE para buenas prácticas de fabricación recomiendan una limpieza exhaustiva, un programa de limpieza escrito y, cuando se usan desinfectantes, el empleo de más de uno. La razón de estos esfuerzos es evitar resistencias, tanto las resistencias naturales, que hacen que los microorganismos sean insensibles a un desinfectante, como las cepas resistentes que podrían desarrollarse mediante selección a partir de microorganismos previamente sensibles.

Se deben usar diferentes tipos de desinfectantes, ya que sus principios activos actúan de distintas maneras. Actúan contra diferentes tipos de gérmenes, por lo que tienen un espectro de acción más amplio. La frecuencia con la que se deben usar estos productos depende de muchos factores, como el proceso de limpieza, la clase de la sala limpia, el tipo de contaminación, las formas de presentación, la facilidad de uso y la compatibilidad con el medio ambiente. Como guía, se recomienda alternar entre tres productos: uno a base de alcohol, otro desinfectante general y un esporicida.

Fuentes:
1. Sandle, T. (2012) Guía para limpiar y desinfectar salas limpias, Surrey: Grosvenor House Publishing.
2. Whyte, W. (2010) Tecnología de salas limpias, Fundamentos de diseño, pruebas y operación, West Sussex: John Wiley & Sons Ltd.
3. Araújo, P. Lemos, M. Mergulhão. Melo, L. Simões, M. (2011) Resistencia antimicrobiana a desinfectantes en biopelículas, Ciencia contra patógenos microbianos: comunicación de investigaciones actuales y avances tecnológicos, p826.
4. Sartain, E. (2005) Rotación de desinfectantes, Disponible: www.cemag.us/print/articles/2005/03/disinfectant-rotation.
5. Martinez, J.E. (2009) ¿El principio de rotación de desinfectantes: cierto o falso? Disponible: http://www.pharmtech.com/pharmtech/Article/The-Rotation-of-Disinfectants-Principle-True-or-Fa/ArticleStandard/Article/detail/580032.
6. "Anexo 1: Fabricación de productos medicinales estériles," Directrices de buenas prácticas de fabricación (GMP) (Bruselas, nov. 2008), Disponible: http://ec.europa.eu/health/files/eudralex/vol-4/2008_11_25_gmp-an1_en.pdf.
7. McDonnell, G. Denver Russell, A. (1999) Antisépticos y desinfectantes: actividad, acción y resistencia, Revisiones de microbiología clínica, ene. 1999, vol 12. No 1 147-179.
8. Boletín de limpieza crítica (2007) contacto Weitzel, S. Limpieza de procesos críticos, CANI, Inc, Disponible: http://cdn.shopify.com/s/files/1/0186/2832/files/BULLETIN_selection_and_rotation_of_disinfectants.pdf?380.
9. Guía para desinfectantes y esterilización en instalaciones de atención médica, 2008, Centros para el Control y Prevención de Enfermedades, Disponible: http://www.cdc.gov/hicpac/disinfection_sterilization/6_0disinfection.html.
10. "Parte 1: Clasificación de la limpieza del aire" Salas limpias y entornos controlados asociados, La norma europea EN ISO 14644-1:1999.

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Sobre la autora Rebecca Smith
Su interés científico la llevó a estudiar Biología, obteniendo una licenciatura. Luego, se incorporó al sector farmacéutico, en la empresa Merck Sharp and Dohme (MSD). Trabajó durante 5 años como representante farmacéutica para MSD, adquiriendo valiosa experiencia que también es esencial para trabajar en el sector de salas limpias. Desde hace 2 años, trabaja en Connect 2 Cleanrooms en el área de Desarrollo Comercial. En este puesto, apoya a los usuarios de salas limpias en su trabajo diario con ellas. En su tiempo libre, disfruta criando a su labrador Charlie.